CHO瞬转|多种工艺适配所有蛋白表达需求
01 细胞传代
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0.3×10⁶ cells/mL接种，每3天传代扩增；转染前一天调整密度至3~3.5×10⁶ cells/mL，转染当天密度长到9~12×10⁶ cells/mL，直接转染。
02 转染
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依次加入4 μg/mL质粒、3 μL/mL NovoCHOTM Booster、7.5 μL/mL NovoCHOTM Trans，轻柔混匀后37℃恒温培养。
03 补料培养
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Day1补加0.3% Enhancer、9% Feed、10 g/L葡萄糖，恒温培养至Day5收获。
04实测数据
以表达Trastuzumab（曲妥珠单抗）和Ocrelizumab（奥妥珠单抗）为例，该方案细胞代谢快，耗糖高，转染细胞生长密度可高达30×106 cells/ml，但细胞活率下降较快，可在第五天收获，Trastuzumab和Ocrelizumab表达量仍高达1.5g/L和1.0g/L，解决客户摇床设备资源有限问题。
（1）细胞生长活细胞密度（VCD）和细胞活率（VIA）数据
（2）蛋白表达产量数据
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传代、接种、转染体系与方案一完全一致，无需重新摸索参数。
02补料控温
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Day1补加0.3% Enhancer、12% Feed、8 g/L葡萄糖，降温至32℃培养。
03收获时间
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培养至Day7收获。
04实测数据
第一天补料量提高3%，转染细胞生长密度可至25×106 cells/mL左右，细胞活率维持较好，第七天仍有80%左右活率，Trastuzumab和Ocrelizumab蛋白表达量可高达2.058g/L和1.871g/L。满足客户方便快捷获得蛋白的需求。
（1）细胞生长活细胞密度（VCD）和细胞活率（VIA）数据
（2）蛋白表达产量数据
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传代、接种、转染体系与方案一、二完全一致，无需重新摸索参数。
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Day1：补加0.3% Enhancer、9% Feed、6 g/L葡萄糖，降温至32℃；Day5、Day9：各补加9% Feed维持细胞生长；Day7、Day11：各补加8 g/L葡萄糖补充能量；
03收获标准
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培养至Day14，或细胞活率低于60%时收获。
04实测数据
转染细胞生长密度在20×106 cells/mL左右，细胞活率维持较好，可长达14天收获。Trastuzumab和Ocrelizumab蛋白表达量D7可达2.24g/L和1.92g/L，D14高达4.7g/L和4.483g/L，如需高量蛋白且时间充裕的客户，可选择该培养策略。
（1）细胞生长活细胞密度（VCD）和细胞活率（VIA）数据
（2）蛋白表达产量数据
